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Colloque
Bacillus megaterium est une bactérie Gram-positive sporulée, apparentée à Bacillus subtilis. B. megaterium est une bactérie importante du point de vue biotechnologique car elle est utilisée dans la production de la vitamine B12. Les gènes hem sont responsables des premières étapes dans la synthèse de la vitamine B12, ce qui nous a déterminé à les cloner. Nous présentons ci-dessous le résultat du clonage du gène hemB de B. megaterium. En vue du clonage, l'ADN chromosomique de B. megaterium a été digéré avec différentes enzymes de restriction et hybridé (Southern) avec une sonde correspondant au gène hemB de B.subtilis qui a …
Colloque
Les ménaquinones font partie de la chaîne respiratoire des bactéries Gram+ où elles remplacent l'ubiquinone. Les premiers mutants men- de S. aureus furent obtenus par sélection avec ménoquine (Sasarman et al. 1969. Nature 224:272), mais aucun essai de clonage des gènes respectifs n'a été entrepris jusqu'à présent. Le but de notre travail a été justement de cloner les gènes men- de S. aureus. Afin de faciliter le clonage des gènes men, nous avons utilisé la mutagénèse à l'aide du transposon Tn917 (Eryr), porté par un plasmide thermosensible (pTV1). Les mutants obtenus ont été identifiés à l'aide de la ménadione, car …
