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Colloque
L'ozone est connu pour causer des cassures simple-et double-brin dans l'ADN. Afin d'étudier l'activité matricielle de l'ADN traité à l'ozone, nous nous sommes intéressées à la réaction de transcription in vitro de l'ADN du bactériophage T7. L'ADN, extrait à partir de phages purs, a été traité à l'ozone, par barbotage, à une concentration de 5 ppm et débit de 0,05 l/min. L'activité totale ainsi que les cinétiques de transcription pour des traitements de 0, 5, 10 et 15 min mesurées par incorporation radioactive de 3H-UTP, montrent une diminution de la synthèse d'ARN en fonction du traitement d'ozone appliqué. L'ozone dans …
Colloque
Nous avons utilisé la méthode de transmidation pour cloner le gène polA sauvage dans un transmidé pRRA101. Le transmidé est un plasmide-hybride (mini-Mu cI(1), pSC101), pendant la transmidation la partie de pSC101 est éliminée et substituée avec le gène cloné ainsi le transmidé devient pleinement autonome. Nous avons obtenu un transmidé, la carte de restriction prouve que le transmidé est mutant parce qu'il y a une délétion dans la partie de mini-Mu. La sélection montre que le gène polA sauvage n'a pas été exprimé. La digestion par des enzymes de restrictions EcoRI et PstI donne une bande 4.2 Kb qui …
Colloque
Dans notre laboratoire, nous avons isolé différents types de mutants (AC85) provenant de B. thuringiensis. Nous avons constaté qu'il n'y avait pas de perte d'efficacité de la protéine cristalline (l'endotoxine-δ) pour les mutants (spo-, cryI) ex. qu'il serait préférable d'utiliser un tel mutant pour l'épandage dans nos forêts, celui-ci ne pouvant survivre, contrairement au type sauvage, donc aucun danger pour l'écologie. Nous avons par la suite extrait les plasmides de B. th. et de nos mutants purifiés sur gradient de CsCl, suivi d'une électrophorèse sur gel d'agarose et comparé les différents patrons plasmidiques avec le type sauvage. Il y a …
