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Évaluation de l'activité de clivage et d'intégration de l'intégrase du VIH-1 obtenue par surexpression dans Escherichia coli
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À ce jour, plusieurs millions de personnes sont atteintes du SIDA et l'utilisation de drogues anti-VIH telles que l'AZT, la ddI et la ddC pour bloquer la transcriptase inverse s'avère problématique à cause de leur toxicité et de l'apparition de souches virales résistantes aux traitements. Il devient donc nécessaire de cibler de nouvelles enzymes essentielles du virus comme l'intégrase (IN), pour développer de nouveaux agents thérapeutiques. L'IN est encodé par l'extrémité 3' du gène pol. Elle joue une activité endonucléase et une activité d'intégration du génome proviral dans le génome de la cellule-hôte. Dans le but de développer de nouveaux …

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Clonage et expression du gène de la protéase HIV-1 dans un système procaryote
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La mise au point d'agents anti-HIV efficaces représente une des tâches les plus urgentes de la lutte contre le SIDA. La protéase de HIV représente une des cibles enzymatiques contre laquelle plus de 30 inhibiteurs sont en cours de test pour développer une thérapie antivirale. Une des conditions nécessaires pour poursuivre ce type de recherches est de produire l'enzyme en quantités suffisantes pour tester l'activité des inhibiteurs synthétiques. Ceci peut être réalisé en clonant le gène de la protéase et en l'exprimant dans un système bactérien. Nous décrivons ici le clonage de ce gène dans le vecteur d'expression pET-16b (Novagen) …

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Conditions d'expression du gène de l'intégrase de HIV-1 dans des cellules bactériennes
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La SIDA est une maladie fatale causée par le virus HIV-1. Tôt après sa pénétration dans des cellules cibles, l'ARN viral est copié en ADN qui est par la suite intégré dans le génome cellulaire. L'enzyme responsable de cette intégration est appelée intégrase (IN). Étant donné son rôle essentiel au cours de la réplication virale et l'isolement de mutants incapables d'intégrer un génome dans l'ADN cellulaire et inaptes à produire de nouveaux virus infectieux, cette enzyme occupe une place privilégiée pour le développement de nouveaux agents thérapeutiques. La mise au point de ces inhibiteurs nécessite de grandes quantités d'enzymes, et …

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