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Colloque
Le gène d'une β-mannanase a été cloné de façon homologue. Une banque génomique de S. lividans, comprenant 25000 clones, a été constituée dans le vecteur pIJ 702. Le criblage des clones a été réalisé sur un milieu solide contenant du galactomannane et la détection a été déterminée par l'hydrolyse du substrat. Trois clones positifs ont été identifiés et par sous-clonage il a été possible de localiser le gène codant pour la mannanase. L'expression de ces clones dans le double mutant 10-164 (cellulase et xylanase négatifs) de S. lividans a mis en évidence l'un d'entre eux qui produit environ soixante fois …
Colloque
Le xylane est une source importante de carbone représentant environ 45% de la biomasse ligno-cellulosique. Afin de dégrader efficacement le xylane, un polymère de xylose relié par des liaisons β1-4, en source de carbone assimilable, Streptomyces lividans possède un système xylanolytique composé de trois enzymes extracellulaires et d'une enzyme intracellulaire. Les xylanases A, B et C attaquent le polymère de façon séquentielle afin de libérer principalement du xylotriose et du xylobiose, substrats de la β-xylosidase qui convertit ces oligosylosides en xylose. Le clonage et le séquençage des gènes, la purification des enzymes correspondants ainsi que l'étude de leur caractéristiques physico-chimiques …
Colloque
Le gène xylA du plasmide pTAF18 de S. lividans 1AF18 ainsi que le gène xylB du plasmide pTAF42 de S. lividans 1AF42 ont été sous-clonés indépendamment chez E. coli JM83 à l'aide du phagémide pTZ18-U. Les transformants obtenus contenant les plasmides pXylA, pXylB ou pXBI et exprimant les xylanases produisent des zones d'éclaircissement sur gélose au xylan contenant du bleu trypan, indiquant la présence de ces gènes chez E. coli nécessite la présence d'un promoteur hétérologue qui permet de démontrer très clairement que l'on retrouve majoritairement dans l'espace périplasmique. Une étude comparant l'activité par western a démontré que les xylanases …
