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Chez les bactéries à gram-négatif, l'électrofocalisation comparative permet de distinguer plus de 26 β-lactamases différentes codées par des plasmides. Comme alternative à cette méthode, nous avons construit des sondes d'ADN synthétiques. Le clonage moléculaire et l'édition de fragments d'ADN nous ont permis de localiser les gènes β-lactamases CARB-4, PSE-4 et SHV-1. Des fragments d'ADN interne aux gènes structuraux ont été séquencés selon la méthode de didéoxy. À partir de nos résultats et des séquences d'ADN connues TEM-1 et OXA-2, nous y avons synthétisé une série de sondes oligonucléotidiques par la chimie des phosphotriesters. La spécificité de chaque sonde a été …
Chez les bactéries à gram-négatif, l'électrofocalisation comparative permet de distinguer plus de 26 β-lactamases différentes codées par des plasmides. Comme alternative à cette méthode, nous avons construit des sondes d'ADN synthétiques. Le clonage moléculaire et l'édition de fragments d'ADN nous ont permis de localiser les gènes β-lactamases CARB-4, PSE-4 et SHV-1. Des fragments d'ADN interne aux gènes structuraux ont été séquencés selon la méthode de didéoxy. À partir de nos résultats et des séquences d'ADN connues TEM-1 et OXA-2, nous y avons synthétisé une série de sondes oligonucléotidiques par la chimie des phosphotriesters. La spécificité de chaque sonde a été …
Chez les bactéries à gram-négatif, l'électrofocalisation comparative permet de distinguer plus de 26 β-lactamases différentes codées par des plasmides. Comme alternative à cette méthode, nous avons construit des sondes d'ADN synthétiques. Le clonage moléculaire et l'édition de fragments d'ADN nous ont permis de localiser les gènes β-lactamases CARB-4, PSE-4 et SHV-1. Des fragments d'ADN interne aux gènes structuraux ont été séquencés selon la méthode de didéoxy. À partir de nos résultats et des séquences d'ADN connues TEM-1 et OXA-2, nous y avons synthétisé une série de sondes oligonucléotidiques par la chimie des phosphotriesters. La spécificité de chaque sonde a été …
Le clonage de gènes impliqués dans la résistance aux β-lactamases a permis de construire 3 sondes d'ADN permettant d'identifier spécifiquement les souches contenant la β-lactamase correspondante. Des fragments d'ADN obtenus par digestion avec des enzymes et restreints à partir des plasmides R46, et pUB4473: Tn1405 et du transconjugant E.coli Q7711 ont été insérés dans le vecteur plasmidique pACY184. Le clonage directionnel et la délétion de fragments d'ADN ont permis de localiser les gènes β-lactamases OXA-2, ARR-1 et PSE-4. Par hybridation moléculaire, nous avons obtenu 1 fragment d'ADN EcoRI-PstI (340pb) spécifique pour OXA-2, 2 fragments AVAI (107 et 340pb) pour AER-1 …
Le clonage de gènes impliqués dans la résistance aux β-lactamases a permis de construire 3 sondes d'ADN permettant d'identifier spécifiquement les souches contenant la β-lactamase correspondante. Des fragments d'ADN obtenus par digestion avec des enzymes et restreints à partir des plasmides R46, et pUB4473: Tn1405 et du transconjugant E.coli Q7711 ont été insérés dans le vecteur plasmidique pACY184. Le clonage directionnel et la délétion de fragments d'ADN ont permis de localiser les gènes β-lactamases OXA-2, ARR-1 et PSE-4. Par hybridation moléculaire, nous avons obtenu 1 fragment d'ADN EcoRI-PstI (340pb) spécifique pour OXA-2, 2 fragments AVAI (107 et 340pb) pour AER-1 …
Le clonage de gènes impliqués dans la résistance aux β-lactamases a permis de construire 3 sondes d'ADN permettant d'identifier spécifiquement les souches contenant la β-lactamase correspondante. Des fragments d'ADN obtenus par digestion avec des enzymes et restreints à partir des plasmides R46, et pUB4473: Tn1405 et du transconjugant E.coli Q7711 ont été insérés dans le vecteur plasmidique pACY184. Le clonage directionnel et la délétion de fragments d'ADN ont permis de localiser les gènes β-lactamases OXA-2, ARR-1 et PSE-4. Par hybridation moléculaire, nous avons obtenu 1 fragment d'ADN EcoRI-PstI (340pb) spécifique pour OXA-2, 2 fragments AVAI (107 et 340pb) pour AER-1 …