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Colloque
Les actinomycètes sont des bactéries Gram positives possédant un cycle de différenciation morphologique complexe qui en fait un bon modèle pour l'étude de la régulation génétique chez les procaryotes. Les actinomycètes sont utilisés industriellement pour la production d'antibiotiques. Les vecteurs de clonage existants ont un nombre limité de sites de clonage (Hopwood, D.A.; et al.). Nous avons construit des vecteurs permettant de cloner chez E. coli et les actinomycètes. Le vecteur utilisé pour E. coli est basé sur ColE1 tandis que celui pour les actinomycètes est basé sur le plasmide pJV1, possédant un nombre de copies par cellule élevé et …
Colloque
Les actinomycètes sont des bactéries Gram positives possédant un cycle de différenciation morphologique complexe qui en fait un bon modèle pour l'étude de la régulation génétique chez les procaryotes. Les actinomycètes sont utilisés industriellement pour la production d'antibiotiques. Les vecteurs de clonage existants ont un nombre limité de sites de clonage (Hopwood, D.A.; et al.). Nous avons construit des vecteurs permettant de cloner chez E. coli et les actinomycètes. Le vecteur utilisé pour E. coli est basé sur ColE1 tandis que celui pour les actinomycètes est basé sur le plasmide pJV1, possédant un nombre de copies par cellule élevé et …
Colloque
L'efficacité de clonage de fragments d'A.D.N. peut être augmentée en réduisant la recircularisation du vecteur, favorisant ainsi la ligation entre le vecteur et les insertions. La désphosphorylation, méthode généralement utilisée à cette fin, est efficace à environ 90%. Nous avons développé une technique difficile à inactiver ce qui complique la procédure (MANIATIS, T. et al.). Nous avons développé une méthode simple qui permet de réduire la recircularisation du vecteur lors du clonage de fragments avec des extrémités 5' saillantes ou franches. La méthode consiste à incorporer un didésoxynucléotide en position 3' terminale du site. En vertu de leur structure, les …
Colloque
L'efficacité de clonage de fragments d'A.D.N. peut être augmentée en réduisant la recircularisation du vecteur, favorisant ainsi la ligation entre le vecteur et les insertions. La désphosphorylation, méthode généralement utilisée à cette fin, est efficace à environ 90%. Nous avons développé une technique difficile à inactiver ce qui complique la procédure (MANIATIS, T. et al.). Nous avons développé une méthode simple qui permet de réduire la recircularisation du vecteur lors du clonage de fragments avec des extrémités 5' saillantes ou franches. La méthode consiste à incorporer un didésoxynucléotide en position 3' terminale du site. En vertu de leur structure, les …
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L'efficacité de clonage de fragments d'A.D.N. peut être augmentée en réduisant la recircularisation du vecteur, favorisant ainsi la ligation entre le vecteur et les insertions. La désphosphorylation, méthode généralement utilisée à cette fin, est efficace à environ 90%. Nous avons développé une technique difficile à inactiver ce qui complique la procédure (MANIATIS, T. et al.). Nous avons développé une méthode simple qui permet de réduire la recircularisation du vecteur lors du clonage de fragments avec des extrémités 5' saillantes ou franches. La méthode consiste à incorporer un didésoxynucléotide en position 3' terminale du site. En vertu de leur structure, les …
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L'efficacité de clonage de fragments d'A.D.N. peut être augmentée en réduisant la recircularisation du vecteur, favorisant ainsi la ligation entre le vecteur et les insertions. La désphosphorylation, méthode généralement utilisée à cette fin, est efficace à environ 90%. Nous avons développé une technique difficile à inactiver ce qui complique la procédure (MANIATIS, T. et al.). Nous avons développé une méthode simple qui permet de réduire la recircularisation du vecteur lors du clonage de fragments avec des extrémités 5' saillantes ou franches. La méthode consiste à incorporer un didésoxynucléotide en position 3' terminale du site. En vertu de leur structure, les …
