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Colloque
Au cours de nos travaux sur la virologie des eaux et en particulier sur les eaux d'égouts sanitaires, nous avons à détecter et identifier de nombreux virus entériques humains. La technique habituelle consiste à titrer l'isolat puis à effectuer une neutralisation de l'infectivité à l'aide d'une batterie d'antisérums monospecifiques utilisés seuls ou en mélange. Comme il existe plus de 70 sérotypes d'entérovirus, plus de 30 sérotypes d'adénovirus et trois sérotypes de réovirus, il s'agit d'un travail coûteux et fastidieux. Afin de réduire la somme de travail nécessaire, nous avons utilisé deux méthodes relativement rapides pour identifier sommairement les virus isolés. …
Colloque
La recirculation de l'air dans les maisons à logements multiples pour fins d'économie d'énergie (chauffage ou climatisation) présente des dangers certains dont l'accumulation de gaz toxiques et la recirculation de certains microorganismes pathogènes. Notre projet a pour but de quantifier et identifier la flore bactérienne et virale de l'air d'une maison à logements multiples. La maison choisie compte 200 logements dont l'air, non recirculé, est évacué par 4 souffleries regroupant chacun 50 logements. L'air est prélevé continuellement de chaque logement par deux ventilateurs d'appoint situés dans la salle de bains et la cuisine. Depuis quelques mois nous avons mesuré la …
Colloque
Le but de notre travail est d'évaluer le contenu viral des eaux d'égouts et de le comparer avec les cas rapportés d'infections virales. Nous avons prélevé des échantillons hebdomadaires (depuis avril 1981) de 5 litres d'eau d'égout à Laval (station de pompage Renaud) et à Montréal (collecteur nord, station 0-8). Les virus ont été concentrés par adsorption-élution sur filtres en fibres de verre et isolés sur cellules Vero ou BSC-1. Les virus furent identifiés par une méthode ELISA (poliovirus), immunomicroscopie électronique et seroneutralisation à l'aide de mélanges d'antisérums. Les virus isolés à Laval et Montréal furent essentiellement les mêmes: les …
Colloque
Le virus de la rubéole est un virus à réplication lente et après de différents passages des nombreuses particules défectives sont formées qui viennent interférer avec le matériel viral. Ces caractéristiques rendent difficile et coûteuse la production massive du virus pour les études sur la structure et l'immunogénicité des protéines virales ainsi que pour préparer un vaccin sous-unitaire à base de protéines purifiées. Trois clonages successifs du virus de la rubéole sur des cultures de lapin (RK13) ont permis d'éliminer les particules défectives interférentes et d'augmenter le titre viral d'environ 10 000 fois. Cependant cette élimination des particules défectives interférentes …
Colloque
Le virus de la rubéole est un virus à réplication lente et après de différents passages des nombreuses particules défectives sont formées qui viennent interférer avec le matériel viral. Ces caractéristiques rendent difficile et coûteuse la production massive du virus pour les études sur la structure et l'immunogénicité des protéines virales ainsi que pour préparer un vaccin sous-unitaire à base de protéines purifiées. Trois clonages successifs du virus de la rubéole sur des cultures de lapin (RK13) ont permis d'éliminer les particules défectives interférentes et d'augmenter le titre viral d'environ 10 000 fois. Cependant cette élimination des particules défectives interférentes …
Colloque
L'acquisition de plus amples connaissances sur les propriétés physico-chimiques de l'hémagglutinine du virus de la rubéole s'avère nécessaire à la mise au point de méthodes de purification des sous-unités pour l'élaboration d'un vaccin. La technique d'électrophorèse en deux dimensions a été appliquée afin de caractériser diverses protéines de l'hémagglutinine du virus de la rubéole. Ces dernières, obtenues par dissociation du virus avec le SDS, sont soumises en premier lieu, à une électrophorèse en gradient de pH équilibré (iso-électrofocalisation). L'identification de trois bandes focalisées est faite par électrophorèse sur gel de polyacrylamide en présence de SDS. Nos résultats préliminaires semblent indiquer …
Colloque
La croissance modérée du VRSH en cultures cellulaires et sa très grande fragilité ont été représenté des facteurs ayant retardé les analyses à caractère biochimique dans le cas de ce virus, isolé il y a plus de 25 ans. Récemment certains groupes ont analysé les protéines de ce virus et ont rapporté des différences importantes quant à la nature des polypeptides identifiés. Nous nous sommes intéressés à ceux afin de caractériser le nombre et la nature de ses protéines structurales. Le VSRH, émisent sur cellules HEp-2 à un indice de multiplicité de 1,0 a été cultivé en présence d'acides aminés …
Colloque
L’immunoprécipitation des protéines virales avec un sérum spécifique et la précipitation des complexes avec la protéine A couplée à Sepharose 4B permettent l’isolement spécifique des protéines virales sans purification préalable du virus. Cette méthode est particulièrement utile lorsque le virus étudié est fragile ou que les membranes cellulaires sont coiffées de virus, comme c’est le cas avec le virus de la rubéole. L’utilisation de la fluorographie (PPO-DMSO) pour la détection de protéines radiomarquées (3H) ou au carbone (14C) dans les gels de polyacrylamide permet de révéler ces protéines avec une sensibilité très grande, comparablement aux protéines révélées par le bleu …
Colloque
L'ultracentrifugation directe (culot) de milieu de culture comme procédé rapide de concentration virale ne s'applique guère au VSRH, des pertes d'infectivité de 99% ayant déjà été rapportées. La très grande fragilité du virus nécessite donc l'emploi de méthodes plus douces. Conséquemment, nous avons contrôlé le VSRH par emploi de polyéthylène glycol (PEG) ou de sulphate d'ammonium (SA) ainsi que par l'ultrafiltration sur fibres creuses. Les deux premières approches permettent une récupération virale similaire (50%) mais inférieure à l'ultrafiltration (75%). L'agrégation virale par le PEG ou SA serait responsable du faible recouvrement observé avec ces méthodes. On note de plus que …
Colloque
Les cultures primaires de reins de singe sont un des systèmes cellulaires de choix pour la détection des virus entériques. Étant donné les difficultés d'approvisionnement pour nos recherches sur les virus dans les eaux, nous avons étudié la formation de plages par 5 virus entériques humains sur 4 lignées cellulaires continues: les BGM, BSC-1, HEp-2 et Vero. Nous avons aussi étudié les différences qui pourraient exister entre différentes couches d'une même lignée cellulaire (Vero). La possibilité de la présence d'inhibiteurs variant avec le type de gélifié utilisé pour la technique des plages, nous a amené à comparer l'effet de deux …
