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Colloque
Le transfert à la température non restrictive de certaines cellules de souris (cellules Cyp; clone Cl2/al) transformées par le mutant ts-P155 du virus du polyome conduit à l’excision, puis à la réplication, d’un génome viral dans lequel sont insérées des séquences cellulaires (Rm1). Nous avons recherché si ces séquences étaient transcrites; par la technique d’hybridation en sandwich: en bref, l’ARN, isolé des cellules Cl2/al, est converti par des enzymes de restriction en fragments qui sont transférés sur filtre de nitrocellulose par la méthode de Southern, puis hybridés, d’abord avec des RNAs extraits des cellules étudiées, ensuite avec divers DNAs radioactifs …
Colloque
La réplication du DNA du virus du polyome telle qu'elle s'effectue dans des cellules provenant d'embryons de souris, a été investiguée. Il a été possible grâce à des expériences incluant un marquage bref à la thymidine radioactive et l'extraction sélective du DNA viral, d'identifier l'intermédiaire réplicatif de ce DNA. La caractérisation de cette nouvelle forme moléculaire a pu dès lors être effectuée par les méthodes d'ultracentrifugation, de chromatographie sur BND-cellulose et de microscope électronique. Il est ainsi apparu que l'intermédiaire isolé représentait une collection de molécules circulaires à divers stades de réplication, molécules dont la structure paraît pouvoir s'expliquer facilement …
