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Isolement d'une topoisomérase de type I chez Streptococcus faecalis
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Les topoisomérases procaryotes ou eucaryotes, de types I et II, sont des enzymes qui modifient la conformation de l'ADN dans des conditions différentes. La topoisomérase de type I catalyse l'isomérisation de molécules d'ADN torsadées en molécules circulaires relâchées, alors que celle de type II effectue l'opération inverse en présence d'ATP. Nous avons découvert chez S. faecalis une topoisomérase de type I qui, contrairement aux enzymes bactériennes connues, fonctionne à haute force ionique (400 mM NaCl). Similaire en ce point aux topoisomérases eucaryotes, elle requiert toutefois des ions Mg++ (2-10 mM) pour fonctionner convenablement. Cette enzyme appartient donc à une catégorie …

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Transfection optimale de cellules de mammifères par l'ADN SV40
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La transfection de cellules avec de l'ADN est une technique d'une importance capitale pour le clonage de gènes et l'étude de leur expression au niveau moléculaire. Cependant, l'aspect préservation des cellules a toujours été négligé dans ces expériences. En effet, la transfection est une infection permettant de conserver le maximum de cellules viables a donc été mise au point. Les cellules Véro (rien de singe) ont été utilisées comme indicateurs à cause de leur sensibilité relative au CaCl2. Nos résultats montrent que l'exposition du feuillet cellulaire à une solution de glycérol avant l'addition d'ADN SV40 précipité par le CaCl2 diminue …

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Transfection optimale de cellules de mammifères par l'ADN SV40
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La transfection de cellules avec de l'ADN est une technique d'une importance capitale pour le clonage de gènes et l'étude de leur expression au niveau moléculaire. Cependant, l'aspect préservation des cellules a toujours été négligé dans ces expériences. En effet, la transfection est une infection permettant de conserver le maximum de cellules viables a donc été mise au point. Les cellules Véro (rien de singe) ont été utilisées comme indicateurs à cause de leur sensibilité relative au CaCl2. Nos résultats montrent que l'exposition du feuillet cellulaire à une solution de glycérol avant l'addition d'ADN SV40 précipité par le CaCl2 diminue …

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Transfection optimale de cellules de mammifères par l'ADN SV40
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La transfection de cellules avec de l'ADN est une technique d'une importance capitale pour le clonage de gènes et l'étude de leur expression au niveau moléculaire. Cependant, l'aspect préservation des cellules a toujours été négligé dans ces expériences. En effet, la transfection est une infection permettant de conserver le maximum de cellules viables a donc été mise au point. Les cellules Véro (rien de singe) ont été utilisées comme indicateurs à cause de leur sensibilité relative au CaCl2. Nos résultats montrent que l'exposition du feuillet cellulaire à une solution de glycérol avant l'addition d'ADN SV40 précipité par le CaCl2 diminue …

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Méthode simple pour l'isolement rapide de plasmides recombinants
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L'insertion d'un fragment d'ADN étranger dans le site Hind III du plasmide pAT153 inactive partiellement le gène tet, responsable de la résistance de Escherichia coli à la tétracycline. En présence de 80 μg/ml d'ampicilline et 4 μg/ml de tétracycline, les bactéries HB101 porteuses d'un plasmide recombinant forment sur agars complets, des colonies de taille inférieure à celles contenant le plasmide sauvage. Cette différence phénotypique importante nous a permis d'obtenir en quelques jours plusieurs centaines de plasmides dans lesquels des fragments Hind III de l'ADN du cytomégalovirus humain avaient été insérés. Dans les conditions actuelles, plus de 70% des petites colonies …

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