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Canaux calciques : chimères et autres fantaisies moléculaires
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Les canaux calciques activés par le potentiel membranaire (VDCC) contrôlent l’entrée du calcium dans les cellules excitables. En conséquence, les cinétiques d’activation et d’inactivation des VDCC déterminent directement la vitesse d’influx calcique dans ces cellules. Élucider les mécanismes moléculaires qui déterminent les cinétiques d'inactivation des canaux calciques. Nous avons construit des chimères entre les canaux alpha-1C (cinétiques lentes) et alpha-1E (cinétiques rapides) ainsi que des mutants ponctuels dans le domaine I de alpha-1E. Les ARNm codant pour la chimère CEEE, le mutant alpha-1E R378E et le triple mutant alpha-1E N381K + R384L + A385D (NRA-KLD) ont été exprimés dans des …

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pen icon Communication
Caractérisation moléculaire de la sélectivité des canaux calciques
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Les canaux calciques s'activant en fonction du potentiel membranaire sont très sélectifs aux ions calciques dans les conditions physiologiques (PCa2+/PNa+>>500). La présence de quatre résidus négatifs glutamate (E) situé dans chacune des 4 régions "pores" (E393, E736, E1145, E1446) des canaux calciques de type-L a1C confère une grande sélectivité pour les cations divalents. La mutation d'un seul résidu glutamate dans le domaine III ou IV pour un résidu glutamine neutre (Q) diminue d'un facteur 10 la sélectivité Ca2+/Na+ (Parent et al., 1995). Les 4 résidus glutamates sont conservés dans la structure primaire de toutes les sous-unités alpha-1 des canaux calciques …

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Caractérisation moléculaire de la sélectivité des canaux calciques
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Les canaux calciques s'activant en fonction du potentiel membranaire sont très sélectifs aux ions calciques dans les conditions physiologiques (PCa2+/PNa+>>500). La présence de quatre résidus négatifs glutamate (E) situé dans chacune des 4 régions "pores" (E393, E736, E1145, E1446) des canaux calciques de type-L a1C confère une grande sélectivité pour les cations divalents. La mutation d'un seul résidu glutamate dans le domaine III ou IV pour un résidu glutamine neutre (Q) diminue d'un facteur 10 la sélectivité Ca2+/Na+ (Parent et al., 1995). Les 4 résidus glutamates sont conservés dans la structure primaire de toutes les sous-unités alpha-1 des canaux calciques …

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Rôle du domaine I dans l'inactivation des canaux calciques
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Les canaux calciques activés par le potentiel membranaire contrôlent l'entrée des ions calciques dans les cellules excitables. Les cinétiques d'activation et d'inactivation des canaux calciques déterminent donc directement la vitesse à laquelle les ions calciques pénètrent dans la cellule. But : Élucider les mécanismes moléculaires qui déterminent les cinétiques d'inactivation des canaux calciques. Méthodes : Le domaine I de a1C a été transposé dans a1E entre les sites ClaI et XhoI. Les ARNm ont été transcrits in vitro et exprimés dans les ovocytes de Xenope. Les cinétiques d'inactivation de la chimère CEEE ont été estimées par voltage imposé. Résultats : …

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