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L’hydrolyse des antibiotiques par les b-lactamases est le mécanisme le plus commun de résistance aux antibiotiques. Pour combattre cette résistance, il existe des inactivateurs suicides comme le sulbactam, le tazobactam et l’acide clavulanique, qui vont inactiver la b-lactamase. Ces inactivateurs sont efficaces contre les b-lactamases de la classe A. Des mutations ont été effectuées aux positions 75-77 et 216-218 de la b-lactamase PSE-4 en utilisant la mutagenèse par remplacement aléatoire de trois codons. Ceci avait pour but d’étudier les interactions de ces acides aminés avec les inactivateurs suicides. Les mutants ont été sélectionnés sur gélose contenant de l’ampicilline avec sulbactam …
Pseudomonas aeruginosa (PA) est un pathogène opportuniste causant des infections secondaires graves chez les personnes atteintes de mucoviscidose. Plusieurs facteurs de virulence de PA ont été identifiés, mais leur importance respective dans le mécanisme d’initiation et/ou de maintien de l’infection n’a pas été démontrée. Nous avons développé une nouvelle méthode permettant d’identifier des gènes essentiels à l’initiation et/ou au maintien de l’infection par PA. Cette méthode découle de la mutagénèse avec étiquettes uniques ("signature tagged mutagenesis" (STM)) où l’identification de gènes essentiels in vivo se fait par sélection phénotypique négative. C’est une méthode qui comporte plusieurs avantages. Entre autres, elle …
Pseudomonas aeruginosa est un pathogène opportuniste responsable de plus de 90 % du taux de mortalité chez les patients atteints de la mucoviscidose. Comme divers microorganismes, P. aeruginosa produit plusieurs facteurs de virulence qui entrainent la colonisation des voies respiratoires de l’hôte. Chez B. pertussis, le pathogène responsable de la coqueluche, il existe un système à deux composantes qui régule l’expression des gènes de virulence. Des homologues des différents domaines des protéines BvgS et BvgA ont été isolés chez P. aeruginosa par la méthode du Pooled Cloned PCR BAC (PCPB) en criblant une banque de P. aeruginosa clonée dans le …
Plusieurs micro-organismes possèdent des pompes ayant une faible spécificité à un substrat. Ces organismes sont capables d’expulser des toxines ayant une conformation structurale différente. Ce type de résistance à plusieurs drogues a été nommé pompes à résistances multiples. La pompe EmrAB chez E. coli confère une résistance à des protonophores (carbonyl cyanide m-chlorophenyl hydrazone [CCCP]) et certains antibiotiques (acide nalidixique, norfloxacin et thiolactomycin). Un homologue de emrAB de E. coli a été identifié chez P. aeruginosa. Suite à un séquençage au hasard d’une banque de P. aeruginosa dans le vecteur pTZ18R, deux recombinants ayant des inserts de 1631 pbs et …