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En chromatographie liquide à haute pression sur échangeur d'ions, les protéines ou peptides absorbés sont habituellement élués par un gradient de pH et/ou un gradient salin. Cependant, dans plusieurs cas, ces deux techniques d'élution ne permettent pas une résolution suffisante pour séparer certaines protéines possédant des propriétés physico-chimiques semblables. La chromatographie par déplacement d'ampholytes en HPLC permet d'augmenter cette résolution. Cette technique consiste en l'établissement d'un gradient de pH naturel (sans champ électrique) par la simple application sur échangeur d'ions d'une solution d'ampholytes de la gamme de pH désirée. L'utilisation de cette méthode en HPLC sur échangeur d'ions et en …
La préalbumine embryonnaire humaine (EPA), une glycoprotéine présente dans le liquide amniotique, le tissu foetal et différents tissus tumoraux a été purifiée et caractérisée à partir du liquide amniotique précoce et d'une mère décédée. Après une extraction de l'EPA le matériel a été séparé par ultrafiltration, chromatographie d'affinité sur Affi Gel Bleu et sur DEAE Affi Gel Bleu. Les dernières traces d'impuretés ont été éliminées en chromatographie par déplacement d'ampholytes sur échangeur d'anions. L'absence de contaminant sérique a été vérifiée par chromatographie en HPLC sur colonne TSK 3000, électrophorèse sur gel, immunoélectrophorèse et immunodiffusion. La préalbumine embryonnaire humaine (EPA-1) n'a …
La préalbumine embryonnaire humaine (EPA), une glycoprotéine présente dans le liquide amniotique, le tissu foetal et différents tissus tumoraux a été purifiée et caractérisée à partir du liquide amniotique précoce et d'une mère décédée. Après une extraction de l'EPA le matériel a été séparé par ultrafiltration, chromatographie d'affinité sur Affi Gel Bleu et sur DEAE Affi Gel Bleu. Les dernières traces d'impuretés ont été éliminées en chromatographie par déplacement d'ampholytes sur échangeur d'anions. L'absence de contaminant sérique a été vérifiée par chromatographie en HPLC sur colonne TSK 3000, électrophorèse sur gel, immunoélectrophorèse et immunodiffusion. La préalbumine embryonnaire humaine (EPA-1) n'a …
Nous décrivons une méthode de dosage du rétinol (vitamine A) par chromatographie liquide à haute pression. Cette méthode ne nécessite que très peu de sérum (100 µl), le tout est traité à l'hexane pour en extraire le rétinol. L'acétate de rétinyle est utilisé comme étalon interne. La méthode est expérimentée au moyen de différents étalons, soit le rétinol, l'acétate de rétinyle, l'acide rétinoïque et le palmitate de rétinyle, afin d'en assurer la spécificité et la reproductibilité. L'extrait lipidique du sérum est élué sur une colonne d'octadécylsilice (ODS-618) par un mélange de méthanol:eau (95:5) préfiltré sur un filtre de 45µ. La …
Le mécanisme d'action des nitrosourées et de plusieurs agents alkylants tels le chlorambucil demeure incertain. L'activité antinéoplasique de ces médicaments est bien connue, mais leur toxicité en limite l'usage à des niveaux vraiment thérapeutiques. Afin d'étudier le mécanisme d'action et d'augmenter l'index thérapeutique de cette classe de composés, nous avons synthétisé une série de molécules hybrides dérivant de l'acide phénylbutyrique et de l'acide chloroéthyl urée. Nous avons mesuré in vitro l'activité pharmacologique de ces nouveaux produits par inhibition de la formation de colonies à l'aide de deux lignées cellulaires, sur une gamme de concentrations variant de quelques unités logarithmiques. Parmi …
L'incidence de carcinome bronchique et pulmonaire est statistiquement plus élevée chez les travailleurs de l'amiante faisant usage de tabac. Nous avons développé un test rapide pour mesurer la capacité de liaison de l'amiante et d'autres fibres minérales pour le benzopyrène (BaP) et la nitrosomornicotine (NNN). Ces cancérigènes sont mis en contact avec la chrysotile canadienne 4T30, l'amiante, la crocidolite et la chrysotile (UICC), la fibre de verre, la laine de pyrex ainsi qu'avec le TiO2. Une quantité constante de chacune des fibres est incubée avec chacun des cancérigènes marqué au tritium, lavée puis comptée. La liaison du BaP et de …
On accorde généralement une grande importance aux dimensions des fibres minérales pour expliquer leur cytotoxicité. Nous avons observé en microscopie électronique le comportement des cellules P388D₁ mises en présence des fibres d'amiante 4730. Plusieurs auteurs ont montré que la phagocytose par ces cellules est comparable à celle des macrophages alvéolaires humains. Nous rapportons ici les résultats des observations effectuées en MET et MEB. Les deux techniques nous montrent clairement que les cellules tentent de phagocyter des fibres de toutes les longueurs et ce, après un temps de contact aussi court que 2 minutes. Après 24 heures, le processus est terminé …