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Colloque
Le sang humain (prélevé dans des tubes héparinés) a été incubé 30 minutes en présence de Protéinase K (200 µg/ml) à 0°C. À ce mélange, ont été ajoutés successivement 2 volumes de tampon HTMW + NP-40, pH 8.3 (Tris, 10 mM; NaCl, 0.1 M; MgCl2, 5 mM; NP-40, 0.1 %) et SDS (Sodium dodecyl sulfate) à une concentration finale de 0.1%. Après une agitation de cinq minutes à la température de la pièce (23°C), ce mélange a été traité au phénol, la phase aqueuse recueillie et retraitée une deuxième fois. La dernière phase aqueuse obtenue a été dialysée 24 hrs …
Colloque
Les leucocytes de sujets normaux ont été cytolysés dans le tampon A (tris 10-3M; MgSO4 1,5 x 10-3M, pH 8.0) en présence de protéinase K (500 µg/ml, final) et de sarkosyl NL-97 (0.1%) et centrifugé à 15,000 x g pendant 15 min., à 20°C. Le culot a été retraité de la même façon et les deux surnageants mis en commun. Le surnageant a une solution saturée de KI, contenant du bromhydrate d'éthidium (50 µg/ml final) ont été mélangés (densité de 1.62) et centrifugés à 70,000 x g, 20°C, 65 h.). Les fractions de RNA ont été dialysées, précipitées et analysées …
Colloque
Les leucocytes de sujets normaux ont été cytolysés dans le tampon A (tris 10-3M; MgSO4 1,5 x 10-3M, pH 8.0) en présence de protéinase K (500 µg/ml, final) et de sarkosyl NL-97 (0.1%) et centrifugé à 15,000 x g pendant 15 min., à 20°C. Le culot a été retraité de la même façon et les deux surnageants mis en commun. Le surnageant a une solution saturée de KI, contenant du bromhydrate d'éthidium (50 µg/ml final) ont été mélangés (densité de 1.62) et centrifugés à 70,000 x g, 20°C, 65 h.). Les fractions de RNA ont été dialysées, précipitées et analysées …
Colloque
Les leucocytes de sujets normaux ont été cytolysés dans le tampon A (tris 10-3M; MgSO4 1,5 x 10-3M, pH 8.0) en présence de protéinase K (500 µg/ml, final) et de sarkosyl NL-97 (0.1%) et centrifugé à 15,000 x g pendant 15 min., à 20°C. Le culot a été retraité de la même façon et les deux surnageants mis en commun. Le surnageant a une solution saturée de KI, contenant du bromhydrate d'éthidium (50 µg/ml final) ont été mélangés (densité de 1.62) et centrifugés à 70,000 x g, 20°C, 65 h.). Les fractions de RNA ont été dialysées, précipitées et analysées …
Colloque
Ce travail démontre que pour une première extraction de l'ARN on peut éliminer le chauffage initial de l'homogénat, et ainsi prolonger la période de l'agitation phénolique: ainsi une quantité plus importante d'ARN peut être obtenue. Les épaulments observés à la densité optique de l'ARN total semblent être causés par un éthanol contaminé (phénol), et que cet effet fut identifié trois fois avant que deux expériences. Toutefois, après une deuxième extraction de l'ARN, aucune contamination de l'alcool sur les pics de l'ARN ne furent observée. Finalement, aucune réaction physique des lapins traités avec le LSD et utilisés pour ces expériences ne …
Colloque
Cette étude est dirigée vers la détermination du site de la synthèse polypeptidique chez le très jeune embryon d'oursin de mer, par fractionnement de l'homogénat embryonnaire selon une sédimentation dans un gradient de densité de sucrose et par analyse chimique de ces fractions. Il fut possible d'étudier où et dans quelle proportion les acides aminés et les nucléotides sont incorporés dans les composés acido-précipitables. Il est démontré qu'une fraction, représentant au moins 25% du total des acides aminés radio-actifs incorporés, sédimente à 12,000 X g (10') mais ne sédimente pas à 480 X g (10'). De plus, cette fraction, laquelle …
