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Colloque
Dans le but de mieux connaître les mécanismes contrôlant l'activité des cellules lutéales, nous avons étudié la réponse de l'AMP cyclique ainsi que celle de la progestérone suite à une désensibilisation avec FSH in vitro. Les cellules obtenues de rates immatures (22-23 jours) prétraitées avec PMSG (25 U.L.) et hCG (5 U.I.) furent d'abord préincubées pendant 2 heures en présence de 3 nM FSH (gracieusement fournie par le Dr. M.K. Sairam). Ces cellules ont par la suite été incubées pendant différents intervalles de temps avant la mesure de la réponse aiguë (90 min) à 3 nM FSH ou 3 nM …
Colloque
Dans le but d'élucider le mécanisme d'action de la LHRH au niveau de l'adénohypophyse, nous avons étudié l'implication possible du métabolisme des phosphoinositides dans des cellules gonadotropes en culture primaire. Ces dernières sont enrichies d'au moins 4 fois après centrifugation isopycnique dans un gradient linéaire de Ficoll de 3 à 7.5X (P/V). La LHRH (30 nM) stimule l'incorporation du 32phosphate (200 µci/ml) dans l'acide phosphatidique (PA) et le phosphatidylinositol (PI) selon une cinétique bien caractéristique. Les stimulations maximales d'incorporation du marqueur sont observées dans le PA et le PI à 2 et 25 min et atteignent alors 175 et 154% …
Colloque
L'hyperprolactinémie est parfois impliquée dans l'infertilité chez l'humain. Afin de déterminer si la prolactine (PRL) peut exercer ses effets inhibiteurs via un changement au niveau des récepteurs hypophysaires à la LHRH, nous avons examiné l'influence des taux élevés de PRL sur le nombre des récepteurs LHRH chez des femelles intactes matures et immatures ainsi que chez des animaux adultes castrés. L'implantation d'hypophyses sous la capsule rénale au matin de l'œstrus empêche l'augmentation des récepteurs LHRH normalement observée trois jours plus tard au matin du proestrus chez la femelle intacte. L'hyperprolactinémie induite par les implants cause une baisse légère, mais significative, …
Colloque
Nous avons récemment étudié le contrôle hormonal du niveau de récepteurs pour l'epidermal growth factor (EGF) dans l'ovaire de rat in vivo. Dans le but d'étudier les mécanismes de l'influence de l'EGF sur la biosynthèse des stéroïdes ainsi que sur les niveaux des autres récepteurs ovaries (LH, FSH, PRL et LHRH), nous avons caractérisé le récepteur pour l'EGF dans des cellules lutéales de rat en culture primaires. Les cellules obtenues de rates immatures (22-23 jrs) pré-traitées avec PMS (25 u.I.) et hCG (25 u.I.) sont incubées en présence d'EGF marqué à l'iode 125 (125I-EGF) avec ou sans excès de peptide …
Colloque
Suite aux données suggérant un effet des catécholamines dans le contrôle des fonctions ovariennes, nous avons étudié le récepteur β-adrénergique dans l'ovaire de rat. Nous avons utilisé un traceur doté de haute affinité, soit le cyanopindolol (CYP 1125). Ce composé se lie avec une unique classe de récepteurs dans l'ovaire avec une constante de dissociation (Kp) de 0.1 nM. Les catécholamines compétitives avec la liaison du CYP 1125 enduisent la sécrétion de progestérone des cellules lutéales en culture primaire en ordre d'efficacité identique typique d'un récepteur β-adrénergique de type β2. Suite à un traitement de 5 jours avec hcg (25 …
Colloque
Des données récemment obtenues dans notre laboratoire ont démontré que la stimulation du récepteur β-adrénergique dans les cellules du lobe intermédiaire de l'hypophyse de rat en culture primaire cause une augmentation parallèle des niveaux d'AMP cycliques (AMPc) et de sécrétion d'α-MSH. Afin d'étudier le processus de désensibilisation, nous avons mesuré les niveaux d'AMPc lors d'une stimulation de 4 heures avec 10 nM (-)isoprotérénol (ISO) et suite à une préincubation avec ISO. L'augmentation de 500% des niveaux d'AMPc due à 10 nM ISO est complètement inhibée lorsque les cellules du lobe intermédiaire sont incubées pendant 2 heures en présence de 1 …
Colloque
Un peptide de 41 acides aminés pouvant stimuler la sécrétion de l'ACTH tant in vivo qu'in vitro a récemment été isolé à partir d'extraits d'hypothalamus de mouton. Utilisant le système des cellules adénohypophysaires de rat en culture primaire, nous avons étudié le rôle possible de l'AMP cyclique (AMPc) comme médiateur intracellulaire de l'action du CRF. Dans ce système, le CRF (100 nM) stimule les niveaux intracellulaires de l'AMPc dès les 30 premières secondes d'incubation pour atteindre une stimulation maximale de plus de 5 fois après 4 minutes pour ensuite décroître lentement pendant 2 heures. Au cours d'une incubation de 10 …
Colloque
Des expériences récentes ont démontré un effet stimulateur marqué de l'épinéphrine et de la norépinéphrine sur la sécrétion d'ACTH in vitro. Cette action des catécholamines est bloquée par le prazocin, un antagoniste α1-adrénergique hautement spécifique. Suite à ces expériences, nous avons étudié une corrélation possible entre les variations nycthémérales des niveaux circulants d'ACTH et de corticostérone et ceux de l'épinéphrine et de la norépinéphrine. Chez la femelle castrée, alors qu'il existe une excellente corrélation entre les niveaux d'ACTH et de corticostérone plasmatique, avec un maximum à 18:00-24:00 h et un minimum à 06:00-09:00 h, une corrélation de l'inverse est observée …
Colloque
Suite à un traitement au charbon-dextran activé nous permettant d'éliminer plus de 99% des stéroïdes endogènes contenus dans le liquide folliculaire de porc, nous avons d'abord effectué des précipitations fractionnées au sulfate d'ammonium. La fraction précipitant entre 20 et 40% de saturation a été ultrafiltrée et le liquide retenu par la membrane (YM-10) a été déposé sur une colonne de Concanavaline-A-Sepharose (C16/70). La fraction post-éluée par mannoside absorbé le gel ne contient pas d'activité inhibitrice sur les niveaux de base de sécrétion de FSH contrairement à la fraction glycoprotéique éluée en présence de 50 mm -méthyl-D-glucopyranoside et 0.5M NaCl dans …
